微生物限度檢查法系檢查非規(guī)定滅菌制劑及其原料、輔料受微生物污染程度的方法。檢查項(xiàng)目包括細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)及控制菌檢查。
儀器有微生物限度檢查儀，集菌儀、無(wú)菌集菌器
微生物限度檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級(jí)下的局部潔凈度 100級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。檢驗(yàn)全過(guò)程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出。單向流空氣區(qū)域、工作臺(tái)面及環(huán)境應(yīng)定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法》的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔凈度驗(yàn)證。
供試品檢查時(shí)，如果使用了表面活性劑、中和劑或滅活劑，應(yīng)證明其有效性及對(duì)微生物無(wú)毒性。
除另有規(guī)定外，本檢查法中細(xì)菌及控制菌培養(yǎng)溫度為30℃～35℃；霉菌、酵母菌培養(yǎng)溫度為23℃～28℃。
檢驗(yàn)結(jié)果以 1g、1ml、10g、10ml或10cm2 為單位報(bào)告，特殊品種可以小包裝單位報(bào)告。
檢驗(yàn)量
檢驗(yàn)量即一次試驗(yàn)所用的供試品量（g、ml 或cm2）。
除另有規(guī)定外，一般供試品的檢驗(yàn)量為10g 或10ml；膜劑為100cm2；貴重藥品、微量包裝藥品的檢驗(yàn)量可以酌減。要求檢查沙門(mén)菌的供試品，其檢驗(yàn)量應(yīng)增加20g 或20ml（其中10g或10ml用于陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)）。
檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)從2 個(gè)以上小包裝單位中抽取供試品，膜劑還不得少于4 片。
一般應(yīng)隨機(jī)抽取不少于檢驗(yàn)用量（兩個(gè)以上小包裝單位）的3 倍量供試品。
供試液的制備
根據(jù)供試品的理化特性與生物學(xué)特性，采取適宜的方法制備供試液。供試液制備若需加溫時(shí)，應(yīng)均勻加熱，且溫度不應(yīng)超過(guò)45℃。供試液從制備至加入檢驗(yàn)用培養(yǎng)基，不得超過(guò)1 小時(shí)。
除另有規(guī)定外，常用的供試液制備方法如下。
1.液體供試品
取供試品10ml，加pH7.0 無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml，混勻，作為1∶10 的供試液。油劑可加入適量的無(wú)菌聚山梨酯80 使供試品分散均勻。水溶性液體制劑也可用混合的供試品原液作為供試液。
2.固體、半固體或黏稠性供試品
取供試品10g，加pH7.0 無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml，用勻漿儀或其他適宜的方法，混勻，作為1∶10 的供試液。必要時(shí)加適量的無(wú)菌聚山梨酯80，并置水浴中適當(dāng)加溫使供試品分散均勻。

智能集菌儀的運(yùn)用辦法是否妥當(dāng)直接影響到儀器的運(yùn)用壽命，集菌儀的操作算不上雜亂，但正確的運(yùn)用辦法對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性仍是有必定的保證，上海秉越站小編整理了常用的集菌儀運(yùn)用辦法和保養(yǎng)技能，期望對(duì)大家的作業(yè)有所協(xié)助。

1. 集?菌儀的運(yùn)用準(zhǔn)備作業(yè)

   1.1翻開(kāi)電源。

   1.2查看儀器工作是否正常，是否有反常噪聲和振蕩。

   1.3加、減速是否滑潤(rùn)有用。

   1.4顯現(xiàn)屏是否顯現(xiàn)正常。

2.集?菌儀的操作辦法

   2.1取出集菌培育器先查看包裝是否完好無(wú)缺，在無(wú)菌室翻開(kāi)無(wú)菌包裝袋。

   2.2將集菌培育器逐一放在不銹鋼座上。

   2.3將集菌培育器的導(dǎo)管裝入智能集菌儀泵頭，要求定位準(zhǔn)確，導(dǎo)管走勢(shì)順利。

   2.4翻開(kāi)帶檢樣品，刺進(jìn)針孔并消毒，然后將樣品瓶定位。

   2.5拔去進(jìn)樣雙芯針管的護(hù)套，刺進(jìn)樣品中，按“Run”鍵，敞開(kāi)集菌儀，再按“40R”“ 60 R”“ 160R”“ 240R”調(diào)理所需轉(zhuǎn)速；按“Up”“Down”鍵可上下調(diào)理轉(zhuǎn)速，施行過(guò)濾集菌（應(yīng)防止雙芯針管進(jìn)氣濾膜被藥液浸濕，影響進(jìn)氣）。

   2.6完結(jié)集菌后，若樣品含抑菌物質(zhì)，用適當(dāng)緩沖液清洗，清洗辦法與集菌進(jìn)程相同。

   2.7啟開(kāi)培育基的鋁蓋，插針孔并消毒。

   2.8摘下頂部空氣濾器開(kāi)口的膠塞，將集菌培育器底部濾器開(kāi)口塞上膠塞，用止血鉗順次開(kāi)閉軟管，敞開(kāi)集菌儀，將培育基泵入的集菌培育器。

   2.9用小夾子夾閉與培育器銜接部的導(dǎo)管，留下5-6cm導(dǎo)管，檢出其余部分，并將開(kāi)口端刺進(jìn)在空氣濾器開(kāi)口上。

微生物限度培養(yǎng)器注意事項(xiàng)：

1.根據(jù)供試品性狀來(lái)選擇濾膜材質(zhì)，過(guò)濾前后應(yīng)保證濾膜的完整性；

2.儀器不工作時(shí)，請(qǐng)斷電；

3.不能抽濾強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、強(qiáng)氧化劑、強(qiáng)腐蝕等液體；

4.當(dāng)供試品中含有不溶性的顆粒，懸浮物時(shí)，可能導(dǎo)致濾膜堵塞影響過(guò)濾，應(yīng)將供試品進(jìn)行預(yù)處理，除去顆粒或懸浮物；

5.抽濾前，應(yīng)確保管道密封性良好.