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凱氏定氮儀基本原理及其校準應用

點擊次數:2139 更新時間:2022-06-22

1  凱式定氮儀工作原理結構
凱式定氮儀作為一種依照凱式定氮法基礎上所設計的儀器,主要運用于對混合物、化合物內總氮含量的測量。能夠實現對于現有所處的催化劑條件下,通過運用液標準完成測定,通過計算酸的消耗量能夠完成樣品內的含氮量計算。由于蛋白質的含氮量系數計算較為恒定,能夠依照氮含量與換算系數相乘,可得蛋白質總含量,作為該方法定量測定蛋白質比較經典。
1.1 消化
(見圖1)作為比較傳統的凱式定氮法消化、蒸餾裝置。通過在燒瓶內混合加入樣品證能夠浸潤樣品。并置于燒瓶在經過預熱至420℃消化單元內,直至經過消化處理燒瓶內消化液呈現透明澄清藍綠色,長達0.5~1h的繼續加熱轉變樣品內存在的有機氮,直至生成無機氮-銨[3]。
1.2 蒸餾
對于消化液取下放冷,在加入至50mL水內,將50mL稱取后加入至接收瓶內,然后將混合指示劑加入其中。將蒸餾裝置連接好之后將5mL過溶液加入至消解燒瓶內,可以中和成為所需運用,之后蒸餾過程開始。轉化消化液內存在的銨銀形成氮餾出,之后可以被過量所吸收[4]。
1.3 滴定及計算
通過運用酸標準溶液,滴定洗手液直至終點,對其中存在的氮、蛋白質含量計算公式如下[5]:
式中:氮含量用N表示;滴定試樣所需的標準酸溶液體積用V1表示;滴定空白所需的標準酸溶液用V0表示;對標定時溶液濃度用c表示;試樣的質量用m表示;試樣消化液的總體積用V表示;試樣內的消化液蒸餾所需體積用v表示。
通過計算之后進行不同試樣種類,氮含量與對應氮換算所得蛋白質系數相乘,即可得出蛋白質含量。

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